抗體危機:Bio-Rad的精確方案[新品推薦]

【字體: 時間:2015年09月18日 來源:生物通

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  很難想象,若沒有抗體,蛋白質研究會變成什么樣。不過,這個至關重要的工具如今也遭遇了信任危機。許多已發表的研究成果被重新評估,這都是因為抗體。例如,2006年發表在《Blood》上的一篇文章(Elliott S, et al.)質疑了人促紅細胞生成素受體(Epo-R)抗體的特異性。

很難想象,若沒有抗體,蛋白質研究會變成什么樣。不過,這個至關重要的工具如今也遭遇了信任危機。許多已發表的研究成果被重新評估,這都是因為抗體。例如,2006年發表在《Blood》上的一篇文章(Elliott S, et al.)質疑了人促紅細胞生成素受體(Epo-R)抗體的特異性。

這令人震驚,因為大量研究都依賴于這種有效性。那些研究表明,Epo-R在各種組織類型的細胞中廣泛表達,包括腫瘤細胞。如果抗體存在缺陷,那么那些結果可能是錯誤的。不幸的是,Blood文章的作者是正確的。他們證實,Epo-R抗體表現出明顯的脫靶結合。之后,其他研究小組也提出了一些證據,說明在許多情況下,Epo-R條帶實際上是熱休克蛋白(HSP70)。

Blood文章的第一作者Steven Elliott博士不認為,這些使用Epo-R抗體的研究人員是別有用心。不過,他們沒有使用對照(特別是陰性對照)來檢測假陽性的數據,或者說,他們只看到了他們想看到的。這樣一來,非特異抗體的使用導致了大量有缺陷的結果,又帶來了新的臨床試驗。毫無疑問,這些臨床試驗未觀察到任何效果。然而,這些抗體仍在市場上銷售。

這樣的故事也許還有很多很多。盡管商業化產品已經出現了幾十年,但抗體依然被認為是不可靠的。根據Bio-rad的調查,在研究人員檢查western blot為什么會失敗時,發現2/3的情況都是一抗有問題。那么問題來了,商業化抗體為何總是表現不佳?研究人員該如何改善這種局面呢?

廠商為什么做不到?

據估計,生命科學研究市場的規模達到20-25億美元。在如此大的市場中競爭,抗體廠商應該有足夠的激勵,將無故障的產品推向市場。然而,至今沒有一家公司能夠做到。為什么?

抗體審查網站CiteAb的創始人Andrew Chalmers博士認為,通用性是廠家的主要挑戰之一。“人們在各種各樣的應用以及不同的物種和組織中使用抗體,”他說。“公司永遠不可能驗證每種用途的抗體。”

在制造抗體時,沒有一家廠商能夠驗證產品的每個可能應用。這是個無限的任務:每個實驗室、每個操作、每一組蛋白都是不同的。如果溫度不能嚴格控制,運輸也帶來了新的變量。“充分驗證抗體是每個最終用戶的責任,”Bio-Rad研發團隊的資深科學家Mark Shulewitz博士指出。

科學家的噩夢

考慮到巨大的應用范圍,所有抗體都存在限制。一些抗體在用于固定細胞時,表現不太好;另一些則可能會與目標蛋白的某個區域結合,干擾其作用機制。在大多數情況下,如果抗體公司向用戶提供了足夠的數據,那么他們可以了解這些不足。遺憾的是,公司往往不能提供足夠的信息。

因此,科學家去尋求其他來源的信息,比如引用了抗體的期刊文章。然而,這些引用也不能太說明問題。有時候,唯一一次western blot成功的圖片被提交上去,也沒有使用陰性對照。為了節省空間,發表的印跡圖經過裁剪,放大了中心條帶。這么做的目的通常不是為了欺騙其他的科學家,但使得讀者對抗體的性能知之甚少。


奧斯陸大學醫院的Fridtjof Lund-Johansen博士利用芯片技術檢驗了6,000多種市售抗體。他表示,根據他的經驗,許多優秀的試劑都沒有引用文獻。通過目前這種排名的方式,市場上任何新產品都不能和之前那些已經有數百篇引用的抗體相比較,即使它們品質卓越。

改變現狀

Bio-Rad是western blot組件的老牌供應商,不過這家公司一直缺乏流程中的一個關鍵元素:一抗。通過開展行業內的調查并與一些頂尖科學家交流,Bio-Rad近日提出了western blot世界需要的精確解決方案。

Bio-Rad新推出的PrecisionAb™抗體產品線解決了數據缺乏和性能可靠性的問題。

• 每個抗體都經過不同細胞系的12種全細胞裂解物的驗證
• 質量控制措施到位,以確保批次之間的可靠性
• 試用裝讓研究人員能夠在特定實驗的背景下檢驗產品
• 每個抗體都附帶陽性對照裂解物,讓研究人員自己能檢驗產品

Bio-Rad很大一部分改進在于關注特定的應用,而不是一次發布數千個抗體。PrecisionAb抗體最初集中在那些經過充分驗證和嚴格篩選的western blot抗體,并附帶廣泛的驗證數據。如果抗體性能欠佳,比如說信噪比低或非特異性結合,那么它不會出現在這個產品線中。同時,它不會選擇性拋棄一些結果,包括未出現目的條帶的結果。

研究人員在看到這些結果時需要記住,特定樣品中缺乏目的條帶“并不意味著蛋白不存在;這只是說明,相對而言它的豐度沒那么高,”Shulewitz談道。“研究人員了解其樣品類型中目標的相對表達水平,我們也給予指導。此外,我們也提供陽性對照,讓客戶可以驗證一下他們的結果是不是和我們一樣。”

這種專業化和全面檢測的組合為研究人員帶來了可靠性和高價值。Bio-Rad計劃擴大其抗體產品,同時仍保證高的質量和可靠性。如欲了解PrecisionAb抗體的更多信息,請訪問http://www.bio-rad.com/PrecisionAbs

了解PrecisionAb抗體的更多信息

(Roumen Bogoev撰寫 / 生物通編譯,有刪節)

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The Antibody Challenge: Bio-Rad’s Precise Solution

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